GLP實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施中屏障環(huán)境是設(shè)施的核心組成部分，為了保證屏障環(huán)境工作的正常運(yùn)轉(zhuǎn)，不僅要長(zhǎng)期固定的為屏障環(huán)境內(nèi)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物提供適宜的溫度、濕度、光照等，還要做好屏障環(huán)境消毒工作。并且定期檢測(cè)消毒效果，保證屏障內(nèi)動(dòng)物無(wú)特定病原微生物的感染，避免影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物健康和實(shí)驗(yàn)結(jié)果。其消毒方法根據(jù)性質(zhì)可分為物理消毒方式和化學(xué)消毒方式。不同的對(duì)象進(jìn)出屏障環(huán)境所選用的方式方法也不同，這是依據(jù)其本身性質(zhì)而決定的。
屏障設(shè)施消毒范圍包括屏障內(nèi)環(huán)境與實(shí)驗(yàn)輔助環(huán)境。除環(huán)境消毒外還包括飼料、墊料、飲用水、籠具、飲水瓶、實(shí)驗(yàn)用具、清潔工具等物品。消毒工作應(yīng)用到的設(shè)備如高壓蒸汽滅菌器、紫外線照射傳遞窗、噴壺等。
一、屏障環(huán)境的消毒
1.屏障環(huán)境啟用前的消毒
對(duì)于屏障環(huán)境啟用前的消毒常采用甲醛-高錳酸鉀熏蒸消毒(又稱福爾馬林熏蒸消毒法)，通過(guò)計(jì)算房間體積，按照房間每立方米體積用甲醛溶液42ml、高錳酸鉀21g以及水21ml計(jì)算試劑用量。熏蒸消毒前應(yīng)把房間內(nèi)被消毒物品表面擦拭干凈，甲醛、高錳酸鉀熏蒸48~72小時(shí)后，通風(fēng)24~48小時(shí)以上工作人員可以進(jìn)入，依據(jù)《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境及設(shè)施》附錄沉降菌檢測(cè)方法檢測(cè)甲醛熏蒸消毒后房間內(nèi)的沉降菌數(shù)量。如果檢測(cè)沉降菌數(shù)≤3個(gè)，即符合消毒標(biāo)準(zhǔn)要求。
2.屏障環(huán)境使用中的維護(hù)性消毒
屏障環(huán)境使用初期往往是無(wú)菌的，隨著試驗(yàn)的開展，工作人員的進(jìn)入難免會(huì)破壞屏障環(huán)境的清潔度。為此GLP機(jī)構(gòu)均制定了一系列維護(hù)性清潔消毒工作。本安評(píng)中心GLP實(shí)驗(yàn)室屏障環(huán)境內(nèi)每日對(duì)籠架臺(tái)面、工作臺(tái)面、地面及易污染區(qū)域用清潔并用消毒劑進(jìn)行擦拭消毒。每周兩次對(duì)房間內(nèi)環(huán)境天花板、墻面、門等用消毒劑進(jìn)行噴霧消毒。按照SOP規(guī)定對(duì)所消毒環(huán)境進(jìn)行檢測(cè)消毒效果。對(duì)于未開展實(shí)驗(yàn)處于空閑的房間每周對(duì)臺(tái)面、地面擦拭消毒一次，每月一到兩次噴霧消毒。
二、物品進(jìn)入屏障環(huán)境的消毒
對(duì)于使用后的籠盒、籠蓋、飲水瓶、瓶塞等物品需要先清潔消毒工作，本單位選用先洗刷后浸泡消毒，再?zèng)_洗晾干的順序來(lái)清潔物品。物品晾干后再次進(jìn)入屏障環(huán)境需要根據(jù)材質(zhì)的不同選擇滅菌方式。例如高壓蒸汽滅菌容器可以對(duì)能承受高壓、高濕環(huán)境的物品消毒，如籠具、飲水瓶、飼料、墊料、抹布等物品的消毒滅菌。傳遞窗是對(duì)不耐高溫、高壓或不能水浸的物料消毒的方法。傳遞窗連通著屏障外環(huán)境與屏障內(nèi)環(huán)境，是普通級(jí)別區(qū)域與屏障環(huán)境級(jí)別的連通器。物品從一側(cè)放入，外表用消毒劑噴霧消毒后，開啟紫外線燈照射15~30分鐘后從另一側(cè)將物品取出。
三、人員進(jìn)入屏障環(huán)境的消毒
人員流向：工作人員更換工作鞋→登記本人姓名、進(jìn)入目的以及進(jìn)入時(shí)間→從工作輔助走廊進(jìn)入第一更衣室→脫去個(gè)人外衣(包含飾品等)放入衣柜，赤腳進(jìn)入第二更衣室→手放于消毒機(jī)下面噴霧消毒→帶一次性口罩、帽子、手套→拿取連體無(wú)菌衣，在黃色區(qū)域內(nèi)穿好→手再次噴霧消毒→進(jìn)入風(fēng)淋室→清潔走廊→到清潔庫(kù)房拿取試驗(yàn)所需要的物品→進(jìn)入飼養(yǎng)房間→試驗(yàn)結(jié)束后進(jìn)入污物走廊→通過(guò)緩沖間返回工作輔助走廊→在第一更衣室門口脫去連體無(wú)菌衣、口罩、帽子、手套→進(jìn)入第一更衣室穿取個(gè)人衣物→穿好后離開第一更衣室登記離開時(shí)間，出屏障環(huán)境。
從人員流向來(lái)看，人員經(jīng)過(guò)了徹底的清潔保護(hù)和消毒工作，穿取有效的隔離防護(hù)后才進(jìn)入到屏障環(huán)境內(nèi)。屏障環(huán)境是進(jìn)出工作人員和建筑設(shè)施共同維護(hù)和保障的融合整體。人員管理要求的科學(xué)規(guī)范與工作人員的切實(shí)執(zhí)行都是保持微生物凈化意義的必要條件。所以每一名工作人員均需要參加培訓(xùn)增強(qiáng)無(wú)菌意識(shí)并且按照地方要求持證(實(shí)驗(yàn)動(dòng)物從業(yè)上崗證)上崗。
四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)入屏障環(huán)境的消毒
保障實(shí)驗(yàn)動(dòng)物安全，屏障環(huán)境要具備檢疫室。本安評(píng)中心設(shè)有檢疫室，并在檢疫室與屏障外環(huán)境之間設(shè)置了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物傳遞窗。
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物流向：新購(gòu)買的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物由廠家裝在SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物運(yùn)輸盒中→檢查外包裝是否完整→通過(guò)盒子上方觀察口觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是否成活且健康→如無(wú)異常則用消毒液(一般為75%酒精)噴霧消毒運(yùn)輸盒→放入實(shí)驗(yàn)動(dòng)物傳遞窗內(nèi)，開啟紫外線燈照射10min→傳入檢疫室→大鼠、小鼠先稱取體重并作檢疫觀察記錄→按照SOP規(guī)定檢疫5~ 7天合格后→進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行試驗(yàn)。
五、新風(fēng)進(jìn)入屏障環(huán)境的消毒
新風(fēng)依靠初、中、高效三級(jí)過(guò)濾凈化系統(tǒng)進(jìn)行物理性滅菌，通過(guò)過(guò)濾凈化使屏障環(huán)境內(nèi)的空氣潔凈度等級(jí)達(dá)到7級(jí)(原標(biāo)準(zhǔn)的10000級(jí))?？諝膺^(guò)濾系統(tǒng)中的初效過(guò)濾器、中效過(guò)濾器和高效過(guò)濾器材料需要及時(shí)更換保證設(shè)施空氣質(zhì)量。其中春秋天的初、中效過(guò)濾器污染堵塞嚴(yán)重，需要頻繁更換保證空氣質(zhì)量。高效過(guò)濾器如更換不及時(shí)，往往會(huì)在高效過(guò)濾器堵塞后出現(xiàn)房間壓力壓差不能保證目標(biāo)要求的現(xiàn)象。
新風(fēng)流向：室外空氣→通過(guò)初效過(guò)濾器→空調(diào)機(jī)組→加濕器→風(fēng)機(jī)(主、備交換)→中效過(guò)濾器→送風(fēng)閥→除濕電加熱→送風(fēng)防火閥→送風(fēng)風(fēng)道→高效過(guò)濾器→送風(fēng)口→從屋頂進(jìn)入室內(nèi)→通過(guò)排風(fēng)口→回風(fēng)管道→建筑頂部排出
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